一、
進口pcr管實驗過程中的注意事項:
實驗操作注意事項盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一,因此,不僅要在進行擴增反應是謹慎認真,在樣品的收集、抽提和擴增的所有環節都應該注意。
1、戴一次性手套,若不小心濺上反應液,立即更換手套。
2、使用一次性吸頭,嚴禁與PCR產物分析室的吸頭混用,吸頭不要長時間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染。
3、避免反應液飛濺,打開反應管時為避免此種情況,開蓋前稍離心收集液體于管底.若不小心濺到手套或桌。上,應立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面。
4、進口pcr管操作多份樣品時,制備反應混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然后分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應的準確度。
5、后加入反應模板,加入后蓋緊反應管。
6、操作時設立陰陽性對照和空白對照,即可驗證PCR反應的可靠性,又可以協助判斷擴增系統的可信性。
7、盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器容易受產物氣溶膠或標本DNA的污染,使用可替換或高壓處理的加樣器,如沒有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過程中加樣器應該,不能交叉使用,尤其是PCR產物分析所用加樣器不能拿到其它兩個區。
8、重復實驗,驗證結果,慎下結論。
總結:進口pcr管實驗過程中的注意事項小編就分享到這了,看完本文您就應該有了基本的認識和了解相信大家都明白了吧!總的來說,希望對大家有所幫助。