熒光定量PCR耗材具有很高的純凈度和穩定性,能更好適應PCR反應過程中反復高低溫設定,并且能夠實現高溫高壓滅菌操作,常常被用于PCR耗材的生產。隨著熒光定量PCR技術的普及,該技術被廣泛用于遺傳、生化、免疫、醫藥等領域,不僅應用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究,還可用于疾病的診斷或任何有DNA,RNA的研究領域。
熒光定量PCR耗材的使用方法如下:
1、PCR板有透明和乳白色可選,其中乳白色更適合用于頂部采集熒光信號的新型熒光定量PCR儀(如伯樂CFX系列,ABI7500fast以上型號,Roche480系列),但如果熒光定量PCR儀是底部光源的,則應選擇透明的。
2、PCR板根據裙邊設計又可分為無裙邊、半裙邊和全裙邊三種設計模式,不同廠家的熒光定量PCR儀會設計不同的切角或邊緣凸起,請選擇適合該PCR儀的板子。
3、PCR板又分100ul體積(矮板)和200ul體積(高板),根據機型的不同選擇,選擇不同高度孔板,避免高度錯誤對機器造成破壞和加熱不均導致數據失真。
4、當使用96孔板做熒光定量PCR實驗的時候,推薦使用光學膜代來密封反應孔。
5、加樣后會在管壁上飛濺一些小液滴,另外反應體系內也會有一些氣泡,需要離心去掉掛壁液滴和氣泡。請使用專用的微孔板離心機解決上述問題。
6、PCR板屬于一次性消耗品,生產一次成型,不建議剪開使用容易造成實驗誤差增加,不能清洗或部分重復利用。不要為了節省一點小錢,而給實驗帶來后續分析上的困擾。